細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Bacterial Reverse Mutation Test),又稱Ames試驗(yàn),是以營(yíng)養(yǎng)缺陷型的突變體菌株為指示生物檢測(cè)基因突變的體外試驗(yàn),可檢測(cè)一個(gè)或數(shù)個(gè)堿基對(duì)的置換、增加或缺失造成的點(diǎn)突變,在食品、藥品、化學(xué)品、化妝品、農(nóng)藥、醫(yī)療器械等多個(gè)領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。
1 Ames試驗(yàn)菌株及菌株鑒定
常用的Ames菌株有組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella Typhimurium)或色氨酸缺陷型大腸桿菌(Escherichia coli)。為保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性,Ames試驗(yàn)需使用菌株組合進(jìn)行試驗(yàn)。推薦的菌株組合方案如下:
鼠傷寒沙門氏菌TA1535
鼠傷寒沙門氏菌TA97a或TA97或TA1537
鼠傷寒沙門氏菌TA98
鼠傷寒沙門氏菌TA100
鼠傷寒沙門氏菌TA102或大腸桿菌WP2uvrA或大腸桿菌WP2uvrA(PKM101)
表1 常用Ames試驗(yàn)菌株突變基因和檢測(cè)類型
然而,因突變型菌株的某些特性易丟失或變異,故需根據(jù)實(shí)際需求對(duì)菌株的基因型進(jìn)行鑒定,保證菌株特性符合Ames試驗(yàn)的要求。尤其是在遇到以下情況時(shí),更應(yīng)該對(duì)菌株特性進(jìn)行確認(rèn):
(1)投入使用前;
(2)在收到培養(yǎng)菌株后;
(3)當(dāng)自發(fā)回變數(shù)不在正常范圍內(nèi)時(shí);
(4)當(dāng)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)誘變劑喪失敏感性時(shí);
(5)當(dāng)需重新進(jìn)行菌株保藏時(shí);
(6)當(dāng)使用主平板進(jìn)行傳代時(shí)。
表2 試驗(yàn)菌株生物學(xué)特性鑒定標(biāo)準(zhǔn)
2 IPHASE新版菌株鑒定試劑盒
IPHASE以各領(lǐng)域細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和指導(dǎo)原則為技術(shù)資料,特將Ames菌株鑒定試劑盒進(jìn)行升版,對(duì)產(chǎn)品組成、規(guī)格、使用方法等多個(gè)方面進(jìn)行了優(yōu)化,避免資源浪費(fèi),使用更簡(jiǎn)單、便捷。
l 高效性
省去了培養(yǎng)基和試劑準(zhǔn)備的時(shí)間,大大提高了工作效率。
l 便捷性
操作簡(jiǎn)單、便捷,方便大家使用。
l 實(shí)用性
依據(jù)Ames試驗(yàn)要求研發(fā),滿足試驗(yàn)需求,又不造成浪費(fèi)。
3 相關(guān)產(chǎn)品
IPHASE/匯智和源憑借多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn),推出了多領(lǐng)域、多種類的科研試劑,為藥物早期研發(fā)提供篩選工具,為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供新材料、新方法和新手段,為食品、藥品、化學(xué)品等的遺傳毒性研究提供便捷產(chǎn)品,望廣大科研工作者咨詢。
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